ATCC培養(yǎng)基的制備涉及到幾個關(guān)鍵的步驟,包括準確稱量試劑、調(diào)節(jié)pH值、過濾、分裝、滅菌等。
在制備培養(yǎng)基時,需要根據(jù)不同的菌類和用途選擇適宜的培養(yǎng)基,將必需的試劑進行嚴格稱量,并確保所有化學(xué)藥品的純凈和準確。培養(yǎng)基的各種成分需放入容器內(nèi)加熱溶解,補充水分后測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計進行測定,并用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)至適宜范圍內(nèi)。
將溶解的培養(yǎng)基通過過濾裝置進行過濾至透明,以去除不溶物和雜質(zhì)。然后將過濾后的培養(yǎng)基分裝于試管或三角瓶內(nèi),塞好棉塞,用牛皮紙包扎好,準備滅菌。培養(yǎng)基的滅菌通常采用高壓蒸汽滅菌法。
ATCC培養(yǎng)基的存放要求包括溫度控制、避免污染、防止光照和保持密封等。這些存放條件對于確保培養(yǎng)基的品質(zhì)和有效性至關(guān)重要。以下將詳細闡述這些存放要求:
1.溫度控制
冷藏保存:大多數(shù)ATCC培養(yǎng)基需要冷藏保存,一般溫度控制在2-8℃。這有助于延長培養(yǎng)基的有效期,同時減緩微生物污染的風(fēng)險。
特定溫度:對于某些特殊培養(yǎng)基,可能需要在室溫或其他特定溫度下保存,這取決于培養(yǎng)基的配方和使用要求。
2.避免污染
無菌操作:在打開培養(yǎng)基容器之前,需要進行無菌操作,避免微生物污染。操作過程中應(yīng)保持手部和環(huán)境的清潔。
密封存放:未開封的培養(yǎng)基應(yīng)保持在原包裝中密封存放,一旦打開,應(yīng)將剩余培養(yǎng)基迅速密封并放回冷藏環(huán)境。
3.防止光照
避光保存:部分培養(yǎng)基成分可能在光照下發(fā)生降解,因此需要在避光條件下保存。尤其是含有敏感成分的培養(yǎng)基,更需注意防止光照。
4.保持密封
干燥劑:大多數(shù)培養(yǎng)基在濕度較高的環(huán)境下容易變質(zhì),應(yīng)保持存放環(huán)境的相對干燥。可以使用干燥劑來幫助控制濕度。
密封容器:培養(yǎng)基容器必須在使用后重新密封,以防止空氣和水汽進入,影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。
5.ATCC培養(yǎng)基定期檢查
檢查保質(zhì)期:在存放期間,應(yīng)定期檢查培養(yǎng)基的保質(zhì)期,確保在使用前沒有過期。過期的培養(yǎng)基可能會失去營養(yǎng)或出現(xiàn)污染,影響實驗結(jié)果。
觀察外觀:定期檢查培養(yǎng)基的顏色、氣味和透明度等外觀特征,若發(fā)現(xiàn)異常,應(yīng)及時處理,以免影響實驗效果。
6.正確標記
標簽信息:在存放培養(yǎng)基時,應(yīng)在容器上標明相關(guān)信息,如名稱、配制日期、有效期等,以便使用時能夠準確識別。
分類存放:不同類型的培養(yǎng)基應(yīng)分類存放,例如血瓊脂培養(yǎng)基和巧克力培養(yǎng)基應(yīng)分開放置,避免混淆。